تعیین کیفی پروتئین در ادرار. روش های تعیین پروتئین در ادرار برای انجام تست هلر، استفاده کنید

باید از قبل فیلتر شود

با اسید سولفوسالیسیلیک تست کنید. حساس ترین و رایج ترین آزمایش با محلول 20 درصد اسید سولفوسالیسیلیک است.

پیشرفت عزم. دو لوله آزمایش شیمیایی علامت گذاری شده اند: "O" - آزمایش و "K" - کنترل. 4-5 میلی لیتر ادرار شفاف در هر دو لوله آزمایش ریخته می شود. 4-5 قطره از محلول اسید سولفوسالیسیلیک 20 درصد را به لوله آزمایش اضافه کنید و خوب مخلوط کنید. هر دو لوله آزمایش در کنار هم روی یک پس زمینه سیاه مشاهده می شوند. اگر پروتئین در لوله آزمایش وجود داشته باشد، کدورت مشخص می شود. لوله کنترل برای مقایسه عمل می کند. حساسیت نمونه به اسید سولفوسالیسیلیک 015/0 گرم در لیتر است.

محصولات تجزیه پروتئین - آلبوموزها - نیز با اسید سولفوسالیسیلیک واکنش مثبت نشان می دهند. برای تعیین علت کدورت، نمونه را گرم می کنند. در این حالت کدورت ناشی از وجود آلبومین از بین می رود و کدورت ناشی از وجود پروتئین تشدید می شود.

تست حلقه هلر پیشرفت عزم. 1 - 1.5 میلی لیتر اسید نیتریک 50 درصد یا معرف Larionova در لوله سانتریفیوژ ریخته می شود. سپس لایه بر روی

همان مقدار ادرار را اسید کنید تا مایع مخلوط نشود. اگر پروتئینی در سطح مشترک مایع وجود داشته باشد، یک حلقه سفید ظاهر می شود. واکنش در برابر پس زمینه سیاه ارزیابی می شود و زمان ظهور حلقه نخ مانند در نظر گرفته می شود. حساسیت نمونه 0.033 گرم در لیتر است. در این محتوای پروتئین، یک حلقه نخ مانند سفید در سطح مایع بین دقیقه دوم و سوم ظاهر می شود.

تکنیک لایه بندی ادرار همیشه لایه لایه با اسید است، زیرا چگالی نسبی ادرار کمتر از اسید است. لایه بندی با پیپت پاستور با بالون انجام می شود که با آن مقدار کمی ادرار جمع آوری می شود. سپس ادرار به قسمت باریک لوله سانتریفیوژ وارد می شود، آن را به صورت مایل نگه می دارد، قطره قطره لایه ای، ادرار را به آرامی در امتداد دیواره های لوله پایین می آورد.

نقطه ضعف نمونه ظاهر شدن یک حلقه رنگدانه از اکسیداسیون اوروکروم با اسید نیتریک است. در ادرار حاوی اورات، گاهی اوقات یک حلقه سفید رنگ در بالای مرز مایع ظاهر می شود.

اگر به جای محلول اسید نیتریک 50 درصد، از معرف Larionova استفاده شود (محلول اسید نیتریک 1٪ در محلول کلرید سدیم اشباع) نتیجه واضح تری از آزمایش هلر به دست می آید.

کمی سازی

مقدار پروتئین در ادرار را می توان به دو روش تعیین کرد: 1) به روش برندبرگ-رابرتس-استولنیکوف با رقیق سازی ادرار. 2) توسط ابری که هنگام افزودن 3٪ اسید سولفوسالیسیلیک ایجاد می شود.

روش برندبرگ-رابرتس-استولنیکوف. این روش بر اساس تست حلقه هلر است. مشخص است که وقتی محتوای پروتئین در ادرار 0.033 گرم در لیتر باشد، در دقیقه 2-3 یک حلقه نخ مانند تشکیل می شود اگر پروتئین موجود در ادرار بیش از 0.033 گرم در لیتر باشد، حلقه زودتر ظاهر می شود و نه یک حلقه نخ مانند پهن. چنین ادراری باید با آب مقطر رقیق شود و دوباره با اسید نیتریک با ادرار رقیق شده لایه شود. اگر بعد از لایه بندی یک حلقه نخ مانند بین دقیقه 2 و 3 ظاهر شد، باید رقت را کامل در نظر گرفت. مقدار پروتئین در این مورد با ضرب درجه رقت ادرار در 0.033 گرم در لیتر نانوگرم تعیین می شود. رقت ادرار با استفاده از ارزیابی تقریبی خواص زیر انتخاب می شود! حلقه ها: اگر بلافاصله یک حلقه نخ مانند ظاهر شود، ادرار 2 بار رقیق می شود، اگر بلافاصله یک حلقه فشرده ظاهر شود، 8 یا 10 بار.

رقیق کردن ادرار در یک لوله سانتریفیوژ اندازه گیری انجام می شود، ادرار را تا علامت 1 میلی لیتر می ریزند و با چند بار رقیق شدن به علامت اضافه می کنند. محتویات لوله آزمایش با پیپت پاستور و بالون کاملاً مخلوط می شود.

گاهی اوقات باید چندین بار ادرار را رقیق کنید. در این مورد، هنگام محاسبه مقدار پروتئین، تمام رقت ها در نظر گرفته می شود. مثال. هنگام لایه بندی کامل ادرار، بلافاصله یک حلقه فشرده ظاهر شد. ادرار را در یک لوله سانتریفیوژ اندازه گیری 10 بار رقیق کنید (1 میلی لیتر ادرار و 9 میلی لیتر آب تا علامت 10). ادرار لایه ای 10 بار روی اسید نیتریک رقیق شده است. اگر بلافاصله یک حلقه عریض ظاهر شود، تعریف کامل نشده است و باید ادامه یابد. از رقت 10 برابری اول باید 4 برابر رقیق دیگر انجام شود. درجه رقت کل در این حالت 40 (10x4) خواهد بود. با ادرار 40 بار رقیق شده، دوباره تست حلقه هلر انجام می شود. هنگامی که یک حلقه نخ مانند بین دقیقه 2 و 3 ظاهر می شود، تعیین باید کامل در نظر گرفته شود.

هنگام کار، اگر حلقه نخ مانند قبل از دقیقه 2 ظاهر شد، می توانید از اصلاح ارلیخ-آلتاوزن استفاده کنید. به منظور رقیق نشدن بیشتر ادرار، نویسندگان پیشنهاد کردند زمان ظهور حلقه نخ مانند را تعیین کنند و زمان را در محاسبه اصلاح کنند. در این حالت مقدار پروتئین با ضرب 0.033 گرم در لیتر در درجه رقت و اصلاح محاسبه می شود. مقادیر تصحیح در جدول خلاصه شده است. 3.

جدول 3. مقادیر اصلاحی برای تعیین پروتئین

زمان تشکیل تصحیح حلقه، دقیقه زمان تشکیل تصحیح حلقه، حداقل

تست حلقه هلر به تجزیه و تحلیل محتوای پروتئین ادرار کمک می کند. این روش که توسط جوزف گلر ابداع شده است بر اساس فرآیند فیزیکی و شیمیایی چسبندگی است. ادرار به شرایط خاصی نیاز دارد: پس از معاینه نیاز به یک نمونه شفاف، که اسیدی است.

برای مطالعه از کنسانتره اسید نیتریک HNO3 استفاده شده است. معرف Larionova نیز برای این روش مناسب است. برای تهیه آن، محلولی از کلرید سدیم به صورت غلیظ تهیه می شود: بیست و پنج میلی گرم نمک به صد میلی لیتر آب اضافه می شود.

بعد، مایع گرم می شود، و انحلال کامل نمک. پس از سرد شدن محلول، مایع رویی خارج شده و نود و نه میلی لیتر با یک میلی لیتر کنسانتره HNO3 ترکیب می شود. همچنین می توان آن را با دو میلی لیتر کنسانتره اسید کلریدریک جایگزین کرد.

الگوریتم

برای آزمایش گلر به لوله آزمایشی نیاز دارید که معرف در حجم یک تا دو میلی لیتر در آن قرار می گیرد. سپس، با دقت بسیار، ادرار آزمایش در امتداد دیواره رگ به نسبت مساوی با معرف اضافه می شود. پس از گذشت سه دقیقهدر اثر متقابل، وجود پروتئین به صورت یک خط مرزی کدر بین ادرار و معرف ظاهر می شود. این حلقه الکل دناتوره شده پروتئینی است.

یک اثر مثبت کاذب از مطالعه ممکن است در مورد استفاده از اسید نیتریک، و همچنین با مقدار زیادی از نوکلئوآلبومین یا نمک اورات رخ دهد. در حالت اول، اگر لوله آزمایش را کمی تکان دهید، حلقه حل می شود. موقعیت دوم وجود حلقه ای را فرض می کند که کمی بالاتر از خط تقسیم قرار می گیرد. با افزایش دمای مایع حل می شود. در برخی موارد، حلقه ای به رنگ قهوه ای ظاهر می شود، این نتیجه اکسیداسیون اوروکروم توسط جزء نیتروژن است.

با مقایسه اثر استفاده از HNO3 و معرف Larionova، می خواهم به گزینه دوم به عنوان دقیق تر اشاره کنم. تعدادی مزیت دارد:

• معرف Larionova در طول تجزیه و تحلیل حلقه های رنگدانه تولید نمی کند.
• حلقه های پروتئینی با وضوح بیشتری نسبت به روش گلر آشکار می شوند.
• اسید نیتریک حفظ می شود.
• این معرف چندان خطرناک نیست و با یک بار روی پارچه، از طریق آن نمی سوزد.

معایب استفاده از نمونه

1. استفاده از تست هلر یک فرآیند نسبتا پیچیده است که به زمان بسیار زیادی و همچنین کنسانتره اسید نیتریک نیاز دارد.
2. ممکن است یک حلقه رنگدانه قهوه ای ظاهر شود که از تشخیص پروتئین جلوگیری می کند.
3. در موادی که حاوی اسید اوریک هستند، یک حلقه سفید ممکن است تشکیل شود که به خوبی بالای خط جداکننده مایعات قرار دارد.
4. این آزمایش همچنین می تواند نتایج مثبت کاذب را در صورت وجود مقدار زیادی اسید اوریک بدهد.

جایگزین

یک راه سریع و آسان برای تعیین پروتئین در ادرار استفاده از کاغذ مخصوص است که یک شاخص است.

در این نسخه از مطالعه، یک نوار کاغذی در مواد غوطه ور می شود که حاوی اشباع خاصی است، به همین دلیل کاغذ شاخص در تماس با ادرار، رنگی از زرد تا آبی به دست می آورد. سایه نشان دهنده غلظت پروتئین است. مقیاسی وجود دارد که با آن می توان این نتیجه را گرفت.

برای اینکه نتیجه تا حد امکان دقیق باشد، باید برخی از قوانین را رعایت کنید:

• pH ماده باید در حد باشد از 3.0 تا 3.5. مقدار زیاد قلیایی نتیجه مثبت کاذب و در مورد مقدار زیاد اسید در ادرار نتیجه منفی کاذب می دهد.
• نشانگر کاغذ نباید بیش از زمان مشخص شده با مواد در تماس باشد. در غیر این صورت، نتیجه مغرضانه خواهد بود.
• همچنین، اگر مخاط بیش از حد وجود داشته باشد، ممکن است یک نتیجه مثبت کاذب وجود داشته باشد.
• بسته به کاغذ و سازنده آن، حساسیت نشانگر ممکن است متفاوت باشد. بنابراین نباید به طور کامل به این آزمایش برای سطح پروتئین در ادرار خود اعتماد کنید.
• ادرار روزانه نمی تواند میزان پروتئین را نشان دهد.

تعیین غلظت پروتئین در ادرار به روش رقیق سازی.

محلول ها: محلول نیتروژن 50 درصد یا محلول لاریون. روش تعیین: یک ردیف از لوله های آزمایش در یک پایه قرار می گیرد و 1 میلی لیتر محلول نیتروژن ریخته می شود، 1 میلی لیتر ادرار اضافه می شود، روی معرف لایه لایه می شود و زمانی که یک حلقه ظاهر می شود، زمان حلقه را یادداشت می کنیم ظاهر. اگر حلقه پهن است، ادرار را رقیق کنید.

4. تعیین غلظت پروتئین در ادرار با اسید سولفوسالیسیلیک 3 درصد.

محلول ها: 3% CK، سدیم کلرید 9%، محلول آلبومین 10% روش تعیین: 1.25 میلی لیتر ادرار شفاف در دو لوله سانتریفیوژ اندازه گیری "O" - آزمایش و "K" - کنترل قرار داده می شود. 75/3 میلی لیتر محلول اسید سولفوسالیسیلیک 3 درصد به محلول آزمایشی و 75/3 میلی لیتر محلول کلرید سدیم 9/0 درصد به محلول شاهد اضافه کنید. بگذارید 5 دقیقه بماند و سپس روی FEC در طول موج 590 تا 650 نانومتر (فیلتر نارنجی یا قرمز) در یک کووت با ضخامت لایه 5 میلی‌متر فتومتریز کنید، آزمایش در مقابل کنترل. محاسبه طبق جدول یا جدول کالیبراسیون انجام می شود. اصل روشمبتنی بر این واقعیت است که پروتئین با اسید سولفوسالیسیلیک باعث ایجاد کدورت می شود که شدت آن با غلظت پروتئین رابطه مستقیم دارد.

5. تشخیص گلوکز در ادرار آزمایش Gaines-Akimov. اصل: گلوکز وقتی در محیط قلیایی گرم می شود، دی هیدروکسید مس (زرد) را به مونوهیدروکسید مس (قرمز نارنجی) کاهش می دهد. آماده سازی معرف: 1) 13.3 گرم شیمیایی. سولفات مس کریستالی خالص (CuSO 4 . 5 H 2 O) محلول. در 400 میلی لیتر آب 2) 50 گرم هیدروکسید سدیم در 400 میلی لیتر آب حل می شود. 3) 15 گرم گلیسیرین خالص در 200 میلی لیتر آب رقیق می شود. محلول اول و دوم را مخلوط کرده و بلافاصله سوم را اضافه کنید. قفسه های معرف. پیشرفت عزم: 1 قطره ادرار و 9 قطره معرف را داخل لوله آزمایش بریزید و به مدت 1 تا 2 دقیقه در حمام آب بجوشانید. تست مثبت: رنگ زرد یا نارنجی مایع یا رسوب.

6. تعیین کیفی گلوکز در ادرار با استفاده از روش گلوکز اکسیداز. اصل روش: گلوکز در حضور گلوکز اکسیداز اکسید می شود، بر اساس واکنش: گلوکز + O 2 گلیکونولانتوم + H 2 O 2. پراکسید H حاصله تحت تأثیر پراکسیداز، بستر را اکسید می کند و محصول رنگی تشکیل می دهد.

اضافه کنید و به مدت 15 دقیقه در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه کنید. به کووت 5 میلی متری CPK نگاه کنید.

سپس محاسبات با استفاده از فرمول انجام می شود: C op = Ext op . Cst/ Ect st.

7. تشخیص اجسام کتون در ادرار با آزمایش لسترید.پودر یا قرص محلول لستراد روی یک لام شیشه ای (در نوک چاقوی جراحی) قرار می گیرد و 2-3 قطره ادرار روی آن می ریزد. اگر اجسام کتونی وجود داشته باشد، رنگ صورتی تا بنفش ظاهر می شود. نمونه با پس زمینه سفید ارزیابی می شود.

8. تشخیص رنگدانه خون در ادرار با آزمایش با محلول الکل 5 درصد آمیدوپیرین.

محلول الکل 1.5% آمیدوپیرین (0.5 گرم آمیدوپیرین محلول در 10 میلی لیتر الکل 96%) محلول 2.3% پراکسید هیدروژن 1.5 گرم هیدروپیریت محلول در 50 میلی لیتر آب) روش کار: 2-3 میلی لیتر اسید استیک را در لوله آزمایش بریزید. - 8-10 قطره از محلول آمیدوپیرین 5% و 8-10 قطره از محلول پراکسید هیدروژن را حداکثر تا 2-3 دقیقه در نظر بگیرید رنگ آمیزی خاکستری بنفش است.

تشخیص اوروبیلین در ادرار با آزمایش نوبائر

این بر اساس واکنش رنگی اوروبیلینوژن با معرف ارلیخ است که شامل 2 گرم پارادیمیل آمینوبنالدئید و 100 میلی لیتر محلول اسید هیدروکلریک (200 گرم در لیتر) است. (در 1 میلی لیتر ادرار و به ازای هر 1 میلی لیتر محلول. ظاهر شدن رنگ قرمز در 30 ثانیه اول نشان دهنده افزایش اوروبیلینوژن است. به طور معمول، رنگ دیرتر ظاهر می شود یا اصلاً وجود ندارد. وقتی ادرار ایستاده، اوروبیلینوژن به اوروبیلین تبدیل می شود و نمونه ممکن است منفی کاذب باشد، زیرا ممکن است ترکیبات پیچیده جانبی آلدهید با پورفیرین ها، ایندول و داروها ایجاد شود.

تشخیص بیلی روبین در ادرار با آزمایش روزین.

محلول الکلی ید (10 گرم در لیتر): 1 گرم ید کریستالی در یک سیلندر با ظرفیت 100 میلی لیتر در 20-30 میلی لیتر الکل اصلاح شده حل می شود و سپس با الکل بر روی علامت بریزید 4-5 میلی لیتر از ادرار را در یک لوله آزمایش شیمیایی قرار دهید و محلول الکلی ید را با دقت روی آن قرار دهید (اگر چگالی نسبی ادرار کم است، در صورت وجود بیلی روبین باید روی محلول الکلی ید قرار دهید). در مرز بین مایعات، یک حلقه سبز رنگ وجود خواهد داشت (هنگام مصرف آنتی پیرین، و همچنین زمانی که سودا در ادرار وجود دارد، آزمایش رنگدانه خون در یک فرد سالم منفی است).

آزمایش ادرار به روش شیمی خشک (مونو پلی تست).

اصل. این روش بر اساس تأثیری است که یک پروتئین روی رنگ یک شاخص در محلول بافر دارد که در نتیجه رنگ از زرد به آبی تغییر می کند.

هنگام انجام واکنش برای حضور پروتئین در ادرار و تعیین pH با استفاده از کاغذ شاخص، توصیه می شود دستورالعمل های زیر را دنبال کنید:

1. ادرار را در ظروف کاملا شسته شده جمع آوری کنید.
2. از ادرار تازه جمع آوری شده و بدون مواد نگهدارنده استفاده کنید.
3. پس از برداشتن تعداد مورد نیاز نوار کاغذی نشانگر، محفظه مداد را با دقت ببندید.
4. مناطق نشانگر را با انگشتان خود لمس نکنید.
5. فقط در تاریخ انقضای ذکر شده روی برچسب استفاده کنید.
6. قوانین نگهداری کاغذ نشانگر را دنبال کنید.
7. نتایج را مطابق با دستورالعمل های دستورالعمل ارزیابی کنید.

انجام آزمایش ادرار با استفاده از دستگاه آنالایزر شیمی خشک ادرار.

پیشرفت عزم. نواری از کاغذ نشانگر از محفظه مداد برداشته می شود و در ادرار مورد آزمایش غوطه ور می شود تا همزمان هر دو ناحیه نشانگر خیس شود. پس از 2-3 ثانیه، نوار روی یک صفحه شیشه ای سفید قرار می گیرد. فورا pH را با استفاده از مقیاس رنگ روی مداد اندازه گیری کنید. مقدار pH در مقیاس رنگ با 6.0 (یا کمتر) مطابقت دارد. 7.0; 8.0; 9.0.

تهیه ادرار، تهیه آماده سازی از رسوب ادرار برای بررسی میکروسکوپی به صورت تقریبی.

بررسی میکروسکوپی رسوب ادرار با استفاده از روشی تقریبی برای تجزیه و تحلیل کلی و شمارش کمی عناصر تشکیل‌شده برای ارزیابی دقیق‌تر درجه لویکوسیتوری و هماچوری انجام می‌شود.

قوانین تهیه رسوب ادرار برای میکروسکوپی

اولین قسمت صبحگاهی ادرار در معرض بررسی میکروسکوپی قرار می گیرد.

پس از اختلاط اولیه، 10 میلی لیتر ادرار گرفته شده و به مدت 10 دقیقه با سرعت 1500 دور در دقیقه سانتریفیوژ می شود.

سپس لوله سانتریفیوژ همراه با ادرار با یک حرکت تند واژگون می شود و مایع رویی به سرعت در یک شیشه خالی ریخته می شود.

مخلوط کنید، یک قطره را روی یک اسلاید شیشه ای قرار دهید و با احتیاط با یک ورقه پوششی بپوشانید.

اگر رسوب از چند لایه تشکیل شده است، آماده سازی را آماده کنید و سپس دوباره سانتریفیوژ کنید و از هر لایه به طور جداگانه آماده سازی را تهیه کنید.

اگر رسوبی برای چشم قابل مشاهده نباشد، یک قطره ادرار روی یک لام شیشه ای ریخته می شود و به صورت میکروسکوپی بررسی می شود.

ابتدا ماده با بزرگنمایی کم (چشمی 7-10، هدف 8) بررسی می شود، کندانسور پایین می آید، دیافراگم کمی باریک می شود، سپس دارو با بزرگنمایی بالا به طور دقیق مورد مطالعه قرار می گیرد (چشمی 10.7؛ هدف 40).

14.مطالعه کمی رسوب ادرار بر اساس نچیپورنکو.

این روش برای فرآیندهای التهابی نهفته و کند (پیلونفریت، گلومرولونفریت)، پیوری نهفته استفاده می شود. برای مطالعه فرآیند پاتولوژیک در دینامیک. برای ارزیابی اثربخشی درمان. مزایای روش:از نظر فنی ساده است، به مقدار زیادی ادرار نیاز ندارد و ماندگاری بالایی دارد. ذخیره آن در عمل سرپایی استفاده می شود. تعهد شرایط: ادرار صبح، قسمت متوسط، محلول اسیدی (در ادرار قلیایی ممکن است تجزیه جزئی عناصر سلولی وجود داشته باشد). 1. ادرار را مخلوط کنید. 2. 10 میلی لیتر ادرار را در یک لوله سانتریفیوژ قرار دهید و به مدت 10 دقیقه با دور 1500 سانتریفیوژ کنید. 3. پس از سانتریفیوژ. مکیدن بالای مایع را پیپت کنید و بگذارید. دقیقا 1 میلی لیتر رسوب. 4. رسوب کاملاً مخلوط شده و اتاق گوریایف پر می شود. 5. 3-5 دقیقه پس از پر کردن، شروع به شمارش عناصر تشکیل شده کنید. 6. شمارش لکوسیت، Er، سیلندر با چشمی 15، عدسی 8 با حذف. کندانسور، در 100 محفظه مربع بزرگ. لکوسیت ها، Er به طور جداگانه شمارش می شوند، سیلندرها (حداقل 4 محفظه Goryaev شمارش می شود) و محیط حذف می شود. عارف X=A x 0.25x 10 6 /l. هنجار: لوک. 2-4 x 10 6 / l، Er تا 1 x 10 6 / l، سیلندر تا 0.02 x 10 6 / L (یکی برای 4 محفظه). در کودکان: سرطان خون. تا 2-4x 106 /l، Er تا 0.75 x 106 /l، سیلندرها تا 0.02 x 106 /l.

15. معاینه ادرار طبق Zimnitsky

این آزمایش توانایی کلیه ها را برای تمرکز مشخص می کند. و ادرار را رقیق کنید. جوهر مهر و موم نمونه. در تعیین دینامیکی چگالی و مقدار نسبی ادرار در بخش‌های سه ساعته در طول روز. انجام آزمایش: بیمار پس از تخلیه مثانه در ساعت 6 صبح در توالت، هر سه ساعت یک بار در طول روز ادرار را در شیشه های جداگانه جمع آوری می کند. در مجموع 8 وعده پیشرفت تحقیق: 1. تحویل. ادرار بر حسب ساعت قرار می گیرد و مقدار و تراکم نسبی در هر قسمت تعیین می شود. 2. مقدار ادرار روزانه و مقدار مایع نوشیدنی را با هم مقایسه کنید تا مشخص شود. درصد دفع آن. 3. دیورز روز و شب را محاسبه کنید، آن را خلاصه کنید و دیورز روزانه بگیرید. 4. محدوده نوسانات را در کمیت و نسبی تنظیم کنید. تراکم ادرار در روز یعنی تفاوت بین کوچکترین و بزرگترین قسمت چیست؟ نمایش دهید. نمونه هایی از افراد سالم افراد: 1. دیورز روزانه 800-1500 میلی لیتر. 2. دیورز در روز به طور قابل توجهی بر دیورز شبانه غالب است. 3. نوسانات حجم ادرار در بخش های جداگانه قابل توجه است (از 50 تا 400 میلی لیتر). 4. نوسانات p از 1.003 تا 1.028، باید بیشتر از 0.008 باشد. با عملکرد نارسایی کلیوی: هیپوستنوری، هیپوایستنوری، ایزواستنوری، هیپراستنوری، الیگوری، آنوری، شب ادراری.

16. شرح خواص کلی مدفوع.

به طور معمول، مدفوع متشکل از محصولات ترشحی و دفعی دستگاه گوارش، بقایای مواد غذایی هضم نشده یا نیمه هضم شده و فلور میکروبی است. مقدار مدفوع 100-150 گرم است. شکل استوانه ای است. بو طبیعی است. رنگ قهوه ای. R-tion - خنثی، کمی قلیایی یا کمی اسیدی (pH 6.5-7.0-7.5). مخاطی وجود ندارد. خون وجود ندارد. هیچ بقایایی از غذای هضم نشده باقی نمانده است.

تعیین ESR

محلول آبی سیترات سدیم 5 درصد، حجم خون 1:4. یک مویرگی کامل از خون جمع آوری شده و با سیترات سدیم (25 بخش) مخلوط می شود. آنها به مدت 1 ساعت در دستگاه Panchekov قرار می گیرند. شوهر نورما 2-10 میلی متر در ساعت، زنان 2-15 میلی متر در ساعت. ESR-inf تسریع شده ملتهب فرآیندها، سرطان خون، بدخیمی ها. نئوپلاسم ها کاهش ESR - افزایش محتوای آلبومین و اسیدهای صفراوی.

رفع اسمیر خون.

از سلول های خونی در برابر تأثیرات آب موجود در رنگ ها محافظت می کند که تحت تأثیر آن در آماده سازی های غیر ثابت همولیز گلبول های قرمز رخ می دهد و مورفولوژی لکوسیت ها تغییر می کند. فیکساتور همچنین باعث انعقاد پروتئین ها می شود و لکه را روی شیشه ثابت می کند. تثبیت کننده ها: متیل الکل (3-5 دقیقه)، محلول ائوزین متیلن بلو مطابق می-گرونوالد، اتیل الکل 960 (30 دقیقه)، کلروفرم (چند ثانیه)، فرمالین (1 دقیقه)، مخلوط نیکیفوروف (20 دقیقه). تثبیت در ظروف مخصوص انجام می شود و آنها را با یک فیکساتور در یک کووت پایین می آورند.

تشخیص پروتئین در ادرار با آزمایش هلر

محلول 50% محلول نیتروژن، محلول اسید لاریونیک. دوره تعیین این است که 1-1.5 میلی لیتر اسید نیتروژن یا معرف Larion را در یک لوله آزمایش قرار دهید و 1-1.5 میلی لیتر ادرار را در امتداد دیواره ها بریزید، یک حلقه سفید ظاهر می شود، مقدار آزمایش 0.033 گرم است /l. حلقه در 2-3 دقیقه ظاهر می شود

2. تشخیص پروتئین در ادرار با 20% اسید سولفوسالیسیلیک.

محلول: محلول 20% ssk: 20 گرم ssk در 70 میلی لیتر دیس آب حل شده و به 100 میلی لیتر اضافه می شود. روش تعیین: 2-3 میلی لیتر سانتریفیوژ ادرار کمی اسیدی را در 2 لوله آزمایش ریخته و 3-4 قطره محلول SSK را در 1 لوله آزمایش بریزید و 2 میلی لیتر دیس آب را در 2 لوله آزمایش اضافه کنید. اگر در لوله آزمایش با معرف پروتئین وجود داشته باشد، کدورت ظاهر شود یا پوسته پوسته ظاهر شود، لوله کنترل شفاف می ماند. حداقل میزان پروتئین در این نمونه 015/0 گرم در لیتر است.

اصل روش:

تراکم نسبی ادرار به طور معمول 1.015-1.025 گرم بر سانتی متر مکعب است. چگالی نسبی ادرار با استفاده از هیدرومترهای کوچک مخصوص به نام اورومتر تعیین می شود. اورومترها دو نوع هستند: اولی - برای ادرار با چگالی نسبی کم و طبیعی (با تقسیمات از 1000 تا 1030 گرم بر سانتی متر مکعب)، دوم - برای ادرار با چگالی نسبی بالا (با تقسیمات از 1030 تا 1060 گرم بر سانتی متر مکعب).

پیش رفتن

در یک استوانه کوچک با قطری که اورومتر آزادانه در آن شناور است، ادرار آزمایش را در امتداد دیواره بریزید و اورومتر را با دقت در آن فرو کنید. با گرفتن خطی در مقیاس اورومتر که مربوط به منیسک پایینی مایع است، قرائت می شود. همه تعیین ها در دمای 20 0 C انجام می شود، زیرا مقیاس اورومتر مطابق با این دما کالیبره شده است. اگر دمای ادرار متفاوت است، برای هر 3 0 درجه سانتیگراد بالاتر از این دما باید اضافه کنید، و برای هر 3 0 درجه سانتیگراد پایین تر - 0.001 را از مقیاس اورومتر کم کنید.

تشخیص اجزای پاتولوژیک ادرار

1. واکنش های کیفی برای تشخیص پروتئین در ادرار - الف) آزمایش هلر با اسید نیتریک غلیظ

اصل روش:

اسید معدنی غلیظ HNO 3 باعث دناتوره شدن پروتئین می شود و نمک های پیچیده پروتئین را با اسید تشکیل می دهد. در مرز دو لایه مایعات، رسوبی به شکل یک حلقه کوچک سفید رنگ تشکیل می شود.

پیش رفتن

1 میلی لیتر HNO 3 غلیظ در یک لوله آزمایش ریخته می شود، لوله آزمایش با زاویه 45 0 کج می شود و 1 میلی لیتر ادرار با دقت در امتداد دیواره با پیپت قرار می گیرد.

ب) نمونه با اسید سولفوسالیسیلیک غلیظ

اصل روش:

اسید سولفوسالیسیلیک آلی غلیظ باعث دناتوره شدن پروتئین می شود. رسوب پروتئین به شکل رسوب یا کدورت با کم آبی ذرات پروتئین و تشکیل نمک های پیچیده پروتئین با اسیدها همراه است.

پیش رفتن

3 قطره اسید سولفوسالیسیلیک 20 درصد را به 1 میلی لیتر ادرار اضافه کنید. هنگامی که پروتئین در ادرار وجود دارد، یک رسوب سفید تشکیل می شود.

2. تعیین کمی پروتئین در ادرار با استفاده از

تست - نوارهای آلبوفان.

اصل روش:

این آزمایش بر اساس اصل "شاخص خطای پروتئین" است. منطقه واکنش شامل یک بافر اکسیژن و یک نشانگر ویژه است که در حضور پروتئین ها رنگ آن از زرد تا سبز به آبی تغییر می کند.

این تست به آلبومین بسیار حساس است و به حضور آن در ادرار با غلظت 0.10-0.15 گرم در لیتر واکنش نشان می دهد. پروتئین های با وزن مولکولی بالا مانند ایمونوگلوبولین ها با حساسیت کمتری نسبت به آلبومین ها اندازه گیری می شوند. پروتئین های با وزن مولکولی کم مانند میکروگلوبولین بتا-2 و پروتئین Bence Jones عملاً توسط این آزمایش تشخیص داده نمی شوند.

ارزیابی تست: اگر رنگ ناحیه واکنش تغییر کند، آزمایش مثبت در نظر گرفته می شود. بسته به غلظت آلبومین در ادرار، ناحیه واکنش ممکن است سبز تا آبی به نظر برسد. این سایه ها با مقیاس رنگی مقایسه می شوند که مناطق آن با غلظت پروتئین 0.3، 1، 3، 10 گرم در لیتر مطابقت دارد.

پیش رفتن

بدون لمس ناحیه واکنشی با دست، نوار تست را به مدت 1-2 ثانیه در ادرار آزمایش پایین بیاورید تا ناحیه خیس شود. سپس ادرار اضافی را از نوار خارج کنید و بعد از تقریباً 1 دقیقه رنگ ناحیه نشانگر را با مقیاس رنگ روی کیت مقایسه کنید و مقدار پروتئین را که بر حسب گرم در لیتر بیان می شود تعیین کنید.

تو برده نیستی!
دوره آموزشی بسته برای کودکان نخبه: "آرایش واقعی جهان".
http://noslave.org

مطالب از ویکی پدیا - دانشنامه آزاد

تست هلر، به نام اتریشی نامگذاری شده است پاتولوژیست I.F Heller، یک نام رایج برای واکنش کیفی به پروتئین در ادرار. نمونه دارای حساسیت 0.033 گرم در لیتر است و در تشخیص بالینی پروتئینوری استفاده می شود. اصل تشخیص پروتئین بر اساس دناتوره شدن آن تحت تأثیر یک عامل دناتوره کننده - اسید نیتریک غلیظ یا معرف Larionova است.

لازم به ذکر است که مقدار مشخصی پروتئین همیشه در ادرار وجود دارد، اما به طور معمول، غلظت آن در ادرار یک فرد سالم زیر آستانه حساسیت یک واکنش کیفی است و با روش های ساده تشخیص داده نمی شود. نمونه برای مقادیر پروتئین بالاتر از 0.033 گرم در لیتر مناسب نیست. در غلظت های بالاتر لازم است ادرار رقیق شود یا از آلبومینومتر Esbach استفاده شود.

برای تعیین مقدار کل پروتئین در ادرار، از روشی مبتنی بر آزمایش هلر استفاده می شود - روش برندبرگ-رابرتس-استولنیکوف (W. Roberts، 1830-1899، درمانگر انگلیسی). این تکنیک شامل رقیق کردن ادرار تا حد پایین حساسیت نمونه (0.033 گرم در لیتر) و زمان تشکیل حلقه 2-3 دقیقه است.

پیشرفت تجزیه و تحلیل

معرفها: اسید نیتریک غلیظ (فوم) یا معرف Larionova. ادرار آزمایش شده باید شفاف و اسیدی باشد.

تهیه معرف Larionova

یک محلول اشباع از کلرید سدیم تهیه کنید (20-30 گرم نمک در 100 میلی لیتر آب گرم حل می شود، اجازه می دهیم تا خنک شود). مایع رویی تخلیه و فیلتر می شود. به 99 میلی لیتر فیلتر 1 میلی لیتر اسید نیتریک غلیظ اضافه کنید (2 میلی لیتر اسید کلریدریک را می توان جایگزین کرد).

تکنیک تحقیق

تقریباً همان مقدار ادرار به دقت در امتداد دیواره در یک لوله آزمایش با 1-2 میلی لیتر معرف قرار می گیرد. در حضور پروتئین، پس از حدود 2-3 دقیقه، کدورت در سطح مشترک بین مایعات مشاهده می شود - یک حلقه سفید از پروتئین دناتوره شده.

نتیجه مثبت کاذب ممکن است هنگام استفاده از اسید نیتریک به دلیل غلظت بالای نوکلئوآلبومین یا نمک های اورات رخ دهد. در حالت اول، هنگامی که لوله آزمایش کمی تکان بخورد، ناپدید می شود، و در حالت دوم، حلقه به طور قابل توجهی در بالای سطح مشترک بین رسانه قرار دارد و هنگام گرم شدن ناپدید می شود. هنگام تکرار آزمایش با ادرار رقیق شده، حلقه تشکیل نمی شود. گاهی اوقات یک حلقه رنگدانه قهوه ای نیز از اکسیداسیون اوروکروم با اسید نیتریک ظاهر می شود.

استفاده از معرف Larionova، برخلاف اسید نیتریک، چندین مزیت دارد: هیچ حلقه رنگدانه‌ای در مرز لایه‌بندی تشکیل نمی‌شود و نتیجه مثبت، حلقه‌های پروتئینی شفاف‌تری می‌دهد.

همچنین ببینید

نظری در مورد مقاله تست گلر بنویسید

پیوندها

ادبیات

[[K:Wikipedia:مقالات بدون تصویر (کشور: خطای Lua: callParserFunction: تابع "#property" یافت نشد. )]][[K:Wikipedia:مقالات بدون تصویر (کشور: خطای Lua: callParserFunction: تابع "#property" یافت نشد. )]]خطای Lua: callParserFunction: تابع "#property" یافت نشد. تست هلر خطای Lua: callParserFunction: تابع "#property" یافت نشد. تست هلر خطای Lua: callParserFunction: تابع "#property" یافت نشد. تست هلر خطای Lua: callParserFunction: تابع "#property" یافت نشد. تست هلر خطای Lua: callParserFunction: تابع "#property" یافت نشد. تست هلر خطای Lua: callParserFunction: تابع "#property" یافت نشد. تست هلر

گزیده ای که توصیف کننده آزمون گلر است

من برای آنها، برای خودم، و برای همه کسانی که جنگیدند بسیار دردناک و غمگین بودم، هنوز هم معتقد بودم که آنها می توانند هر چیزی را تغییر دهند... آیا واقعاً می توانستند؟.. اگر همه کسانی که می جنگیدند فقط می مردند، آیا من می کردم. جنگ؟..
ناگهان عکس دیگری درست مقابلم ظاهر شد...
در همان «سلول» سنگی کوچکی که بدن خونین مجدلیه هنوز روی زمین افتاده بود، در اطراف او، زانو زده، شوالیه‌های معبد او ایستاده بودند... همه آن‌ها به‌طور غیرمعمولی لباس‌های بلند سفید به تن داشتند. آنها در اطراف مجدلیه ایستادند و سرهای مغرور خود را به زیر انداختند و اشک‌ها بر چهره‌های خشن و متحجر آنها جاری شد... اولین کسی که برخاسته بود مجوسی بود که زمانی دوستش جان بود. او با احتیاط، انگار از آسیبی می ترسید، انگشتانش را داخل زخم فرو کرد و با دستی خون آلود روی سینه اش چیزی شبیه به صلیب خونین کشید... دومی هم همین کار را کرد. بنابراین آنها یکی یکی برخاستند، با احترام، دستان خود را در خون مقدس فرو کردند، روی لباس های سفید برفی خود صلیب های قرمز کشیدند... احساس کردم موهایم سیخ شد. این یاد آور نوعی مراسم مقدس وحشتناک بود که هنوز نمی توانستم آن را درک کنم ...
آهسته پرسیدم: «چرا این کار را می‌کنند، سیور؟».
- این یک سوگند است، ایسیدورا. سوگند انتقام ابدی... آنها به خون مجدلیه - مقدس ترین خون برای آنها - سوگند یاد کردند تا انتقام مرگ او را بگیرند. از آن زمان به بعد بود که شوالیه های معبد شنل های سفید با صلیب های قرمز پوشیدند. فقط تقریباً هیچ یک از افراد خارجی هرگز معنای واقعی آنها را نمی دانستند ... و به دلایلی همه خیلی سریع "فراموش کردند" که شوالیه های معبد قبل از مرگ مجدلیه در لباس های ساده قهوه ای تیره پوشیده بودند و با هیچ صلیب "تزیین" نشده بودند. شوالیه های معبد، مانند کاتارها، از صلیب به معنایی که کلیسای مسیحی آن را «تقدیر» می کند، متنفر بودند. آنها او را یک سلاح قتل شرور و شیطانی، ابزار مرگ می دانستند. و آنچه با خون مجدلیه روی سینه خود نقاشی کردند معنای کاملاً متفاوتی داشت. فقط این است که کلیسا به طور کامل معنای شوالیه های معبد را "تغییر" داد تا مطابق با نیازهایش باشد، مانند هر چیز دیگری که به رادومیر و مجدلیه مربوط می شود.
به همین ترتیب پس از مرگش، مجدلیه متوفی را علناً یک زن خیابانی اعلام کرد...
- همچنین فرزندان مسیح و ازدواج او با مجدلیه را انکار کرد ...
- او همچنین هر دوی آنها را "به نام ایمان مسیح" نابود کرد، که هر دو تمام زندگی خود را به شدت با آن جنگیدند ...
– قطر را نیز با استفاده از نام مسیح نابود کرد ... نام مردی که ایمان و دانش او را آموزش دادند ...
- او همچنین تمپلارها (شوالیه های معبد) را نابود کرد، آنها را پیروان شیطان معرفی کرد، به اعمال آنها تهمت و تهمت زد و خود استاد را که از نوادگان مستقیم رادومیر و مجدلیه بود، ابتذال کرد.
کلیسای مسیحی با خلاص شدن از شر همه کسانی که به نوعی می توانستند به پستی و پستی "مقدس ترین" شیاطین روم اشاره کنند، افسانه ای ایجاد کرد که به طور قابل اعتمادی توسط "شواهد غیرقابل انکار" تأیید شد که هیچ کس به دلایلی آن را بررسی نکرده بود. و هیچ کس حتی فکرش را هم نمی کرد که من می خواهم به آنچه در حال رخ دادن است فکر کنم.